随着细胞治疗领域的迅猛发展，实现稳定且可重复的诱导多能干细胞（iPSC）扩增，成为推动这一治疗手段的关键所在。通过系统化的生物过程设计，识别和优化关键工艺输入变量（PIVs），我们成功提升了iPSC在PBS垂直轮反应器内的扩增稳健性和重复性。这不仅减少了生产成本和周期，也为大规模生产和临床应用提供了坚实保障。

iPSC及其衍生特化细胞的生产过程复杂且漫长，涉及多个相互依赖的工艺输入变量。对于临床应用所需的大量iPSC衍生细胞（超过10^8个细胞），大规模生物反应器是必不可少的。然而，操控大规模反应器的高成本，使得开发可在小规模（100-500mL）下高效且可重复的过程至关重要。

在这方面，PBSBiotech开发了一套标准化的iPSC扩增工作流程，采用微缩版的垂直轮（VW）生物反应器（PBS-01和PBS-05Mini），该流程不仅展现了极高的稳健性和可重复性，还能平滑地扩展至PBS-15，为iPSC生产提供了可靠工具，降低了开发成本，提升了生产效率。

在iPSC制造领域，由于缺乏详细的实验方案和标准化的结果报告，不同实验室间的iPSC培养方法对比颇具挑战。尤其是在3D悬浮培养方面，虽然已有多项研究报告了细胞生长性能指标如倍增时间、特定生长率和最大细胞密度等，但这些指标的数值差异大，且缺乏一致性。在现有文献中，关于实验方法和结果可重复性的探讨也非常有限。

通过系统分析关键工艺输入变量的范围，PBS成功开发出一套基线iPSC扩增协议，旨在确保实验的可复制性和稳健性，展示了良好的结果一致性和可靠性。这一协议已在多个iPS细胞系上经过多次验证，涵盖不同操作员及各种培养基，适用聚集体和微载体培养。

值得注意的是，iPSC聚集体分化为自然杀伤（NK）免疫细胞时，拟胚体（EB）的大小和密度是关键工艺输入变量。虽然目前尚未明确这些PIV的最佳参数，但通过调整生物反应器的搅拌速率及培养基更换策略，我们能够有效控制和表征这些变量。

在细胞生长性能的一致性方面，通过使用相同的关键工艺输入变量，将工作体积从PBS-01的100mL扩展至PBS-15的10L，实验涵盖了多种喂养策略，确保细胞生长曲线的一致性和可重复性。

为了实现可重复的实验并获得功能性细胞，采用的培养基质应能模拟体内环境。此时，人生就是博-尊龙凯时的全长Biolaminin蛋白发挥着重要作用，已经在多项研究中证明其在培养多能干细胞、分化细胞和原代细胞方面的有效性。Biolaminin521是一种全长人重组层粘连蛋白，具有明确成分，能够支持iPSC良好贴附和增殖，且不含动物成分，非常适合临床应用。

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