什么是包被细胞培养瓶试剂?包被试剂是一种用于处理细胞培养瓶、板或皿表面的化学物质,旨在模拟细胞在体内的生长环境,以促进细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面能够更有效地支持细胞的生长及功能表达。本文将详细介绍几种常用的包被试剂及其特性,并分享操作过程中需要注意的事项,以便您轻松提升细胞培养效果。
常见的包被试剂及使用方法
01 明胶(Gelatin)CSP132
明胶是一种常用的包被试剂,能够促进细胞的贴壁与增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。
适用细胞:胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等。
特点:价格低廉,易于使用,能够提供优良的细胞附着支持。
使用浓度:1-20mg/ml,即1mg/ml-20mg/ml。包被体积通常以完全覆盖培养瓶底部为准,T-25瓶25ml,T-75瓶75ml。包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。接种细胞前,请吸除多余的明胶溶液,并用PBS清洗1-2次。
02 多聚赖氨酸(PLL)CSP073
多聚赖氨酸是一种相对分子量为70,000~300,000的细胞培养生长基质,能够促进细胞粘附和贴壁,广泛应用于细胞培养。
适用细胞:神经元细胞、原代细胞、悬浮细胞等。
特点:通过静电作用增强细胞的附着,适合难以贴壁的细胞。常用浓度为0.01%至0.1%(w/v),即0.1mg/ml至1mg/ml,包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。
03 重组人纤连蛋白(FN)CSP044
重组人纤连蛋白是一种重要的细胞外基质蛋白,参与多种生物学功能,能与细胞表面及细胞外基质多个组分结合。
适用细胞:干细胞、间充质干细胞、内皮细胞、上皮细胞、肿瘤细胞、成纤维细胞。
特点:作为细胞培养基质显著提升细胞贴壁率,增强代谢水平,缩短生长时间。常用浓度为1µg/cm²至10µg/cm²,包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。
04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)CSP145
鼠尾胶原蛋白是一种主要为Ⅰ型的胶原蛋白,适用于多种细胞类型的培养,能够模拟细胞外基质环境。
适用细胞:上皮细胞、肝细胞、肌细胞等。
特点:可以形成清晰的凝胶,提供3D基质,促进细胞贴壁与增殖。常用浓度为1-5µg/cm²,包被体积为T-25瓶25ml去离子水+50µl(1mg/mL鼠尾胶原蛋白Ⅰ),通常在4°C过夜后吸出多余溶液,再次用PBS洗涤2-3次后即可接种细胞。
包被注意事项
1. 无菌操作:所有操作需在无菌条件下进行,防止污染。
2. 均匀覆盖:确保包被试剂均匀分布在培养瓶底部,避免局部过厚或过薄。
3. 浓度优化:根据细胞类型与实验需求优化包被试剂的浓度。
4. 孵育时间:根据实验要求调整孵育时间,确保充分包被。
5. 储存条件:包被后的培养瓶可在4°C短期储存,建议尽快使用以保持最佳效果。
通过选择合适的包被试剂并遵循精准的操作步骤,您可以显著提升细胞的贴附与生长,为后续实验提供可靠的细胞模型。在这一过程中,人生就是博-尊龙凯时将为您提供专业的技术支持与优质的产品,助您在实验室中取得更卓越的成果。